Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的流程中逐渐扩展

从第一次再次出现人体内自身突变到再次出现1HG癌症诊断疼痛的十分困难率在孩童时期就有很好的所述，多个人体内自身突变HIV的孩童当中有70%在血清变换后10年内患上癌症，而随访15年的孩童这一百分比增高到84%。相对于来说，占诊断1HG癌症一半以上的HG1HG癌症的当中风机制还没得到充分的学术研究。

越来越多的人开始常用分期管理系统来并不一定1HG癌症的十分困难：生殖在再次出现多种人体内自身突变时踏入第1过渡阶段，再次出现血糖精神状态时踏入第2过渡阶段，再次出现疼痛时踏入第3过渡阶段。一些多发人体内自身突变HIV的生殖，在1期和2期，十分困难较较慢，并发展为当中风的1HG癌症。我们早先所述了一分组在首次样品到多种人体内自身突变样品后非常极多10年无癌症的极较慢十分困难者，这分组病人人数极多，但完全相同之处非常清楚。随后，我们发现人体内自身上皮细胞特异性CD8+T细胞膜反应在十分困难比较较慢的病人当中前提不长期存在，但在近期当中风和长期长期存在的癌症病人当中很很难样品到。这可能会表明，与十分困难病人相对于来说，这些病人自身免疫反应的调节增强。

早期学术研究表明，尽管调节性T细胞膜(Treg)数量也就是说，但癌症病人长期存在一些功能缺点，其当中之外对IL-2的反应并能降低。此外，癌症病人当中的振荡CD4+T细胞膜可能会对调节格外具抵抗性，表现为振荡T细胞膜的消除减较慢，纯净产生的Treg和体外产生的抑制Treg，以及上皮细胞个人经历的CD4+T细胞膜当中IL-2反应减较慢。本学术研究的目的是所述了CD4+调节性T细胞膜(Treg)在一小群极比较较慢十分困难者当中的完全相同之处，他们的平均年龄为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

方法：BOX学术研究是一项以人群为基础的纵向学术研究，在21岁表列出院的病人亲属当中检查1HG癌症的危险因素。我们早先所述了长期比较较慢十分困难者的完全相同之处，他们保持多重人体内自身突变HIV超过10年，但没再次出现癌症的诊断疼痛，较慢性或非开展性自身免疫。随后，10名继续保持无癌症并情愿提供大量血液样品的比较较慢十分困难者纳入T和B细胞膜功能分析。在目前的学术研究当中，8名较慢十分困难者(SP分组)，当中位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁彼此之间的人体内自身突变HIV。所有的与会者都西北面1HG癌症十分困难的1期，尽管一些人随后失去了人体内自身突变对某些上皮细胞的HIV反应，然而，一名病人已经西北面2期非常极多6年，但没再次出现诊断疼痛，一名病人被诊断为癌症，该人脑72岁，在采集实验样品时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在数据分析当中对该ADP开展了原则上指标。复合外周血单个核能细胞膜(PBMCs)，采用多模板流式细胞膜术和T细胞膜消除测试指标ADP当中Treg的振幅、遗传基因和功能。常用FlowSOM和CITRUS(聚类检验、举例来说和重归)开展无指派聚类分析，指标Treg遗传基因。

结果：与保健ADP相对于来说，来自较慢十分困难体的梦境CD4+T细胞膜的指派聚类推测，激活的梦境CD4+ Treg振幅增高，与阿托品抑制的TNFR之外细胞内(GITR)表示增高有关。一名HbA1c升高的病人与十分困难比较较慢者和匹配的对照分组相对于来说，Treg五音有所完全相同。功能分析表明，与保健ADP相对于来说，来自比较较慢十分困难体的Treg介导的CD4+振荡T细胞膜消除明显受损。表现为对振荡CD4+T细胞膜CD25和CD134表示的消除增高。

三幅1 深入的遗传基因分析推测，CD4+Treg非典HG在较慢十分困难配置文件当中增高。由FlowSOM生成的Treg四楼，聚集在来自所有ADP的活CD4+CD45RA -细胞膜上。根据上标物表示检验出10个元簇:梦境T细胞膜_1;梦境T cell_2;梦境T cell_3;梦境T cell_4;CD49b梦境T细胞膜;HLA-DR + GITR +梦境T细胞膜;该线程Treg_1;该线程Treg_2;该线程Treg_3;和该线程Treg_4。(a)常用9个完全相同Treg上标生成的10个元簇的MST。每个路由代表人一个战略性(100个战略性)，格外大的元战略性(10个元战略性)在路由分组周围上色。每个路由当中的饼三幅表示单个上标的表示高级别。(b)每个元聚类的热三幅，以推测整体上标表示。(c, d)为HD分组(c)和SP分组(d)生成三幅，以及FlowSOM定位的每个元簇的覆盖层。(e-l)相对于重元素为每个metacluster筒该线三幅(重元素> 0.05%)相符为HD和SP分组:该线程Treg_2 (e),该线程Treg_3 (f),该线程Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +梦境T细胞膜(h)、梦境T cell_1(i),梦境T cell_2 (j),梦境T cell_3 (k) n d CD49b梦境T细胞膜(l)。橘色橘色代表人**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对大写字母秩核能查。此键适用于三幅形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

三幅2 常用CITRUS的预测模HG表明，Treg振幅的增高是十分困难比较较慢的标志。分级依赖型(a - f)和柑橘分析(g-k)比较SP与会者和匹配的HD与会者在CD4+CD45RA−T细胞膜上的差异。(a)流感病毒CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l社会群体的代表人性三幅。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR表示开展复合，模拟FlowSOM社会群体。(b) HD(黑点)和SP(蓝点)分组以及ADPSP 606(橘色)当中CD25+ cd127的振幅统计三幅。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+依赖型子集的筒该线三幅;(c) HLA-DRloGITR−(该线程Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(该线程Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(该线程Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+该线程T cell)。(g - i)柑桔簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3表示强度着色，箭头引人注意的簇被定位为SP和HD配置文件彼此之间的完全相同。(j)筒该线三幅推测了在SP(蓝点)和HD(灰点)分组当中，CITRUS梦境Treg_3和Treg_4的相对于重元素(百分比)。(k)直方三幅推测每个簇的遗传基因(红色)和Treg上标相对于表示与或多或少表示(蓝色);上列，该线程Treg_3;前面一行，该线程Treg_4。或多或少与所有其他簇当中上标的表示有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对大写字母秩核能查

三幅3 与保健献血者相对于来说，十分困难比较较慢者梦境treg的GITR增高。每个梦境CD4+T细胞膜元簇(梦境T细胞膜_1;梦境T cell_2;梦境T cell_3;CD49b +梦境T细胞膜;HLA-DR + GITR +梦境T细胞膜;该线程Treg_2;该线程Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)样品每个表示上标的巨大变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)配置文件的表示热三幅(sp606不之外在内)。(c,d)梦境Treg_4元簇当中所有HD(灰色)、所有SP(蓝色)和SP 606(橘色)的FlowSOM GITR表示串接，推测直方三幅(c)和统计三幅(d)。Wilcoxon配对大写字母秩和核能查，p< 0.07(橘色)所有ADP之外，p< 0.05(蓝色)ADPSP 606和匹配的HD不之外在测试当中。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs当中GITR表示，从分级依赖型，从所有HD(灰色)、所有SP(蓝色)和SP 606(橘色)串接，推测直方三幅(e)和统计三幅(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对大写字母秩核能查

三幅4 来自比较较慢十分困难的CD4+ treg细胞膜控制振荡CD4+T细胞膜的并能降低。SP分组用蓝色的该线和橘色表示，HD分组用黑色的该线和橘色表示，橘色的该线/橘色表示ADPsp606。常用CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞膜开展分选。CD4+CD25−(反之亦然者)被上标为CFSE, Treg按观察的百分比滴定。用抗CD3 /28微珠转化细胞膜，人才3天后开展流式细胞膜术样品。(a-d)与CD4+反之亦然者相对于应的treg人才(自体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD反之亦然者人才。(a,b,f) CFSE转化(a,e)和CFSE消除一般而言(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的消除一般而言。常用HIV对照(激活的响应细胞膜不含treg)算出消除一般而言。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

三幅5 振荡CD4+T细胞膜对比较较慢十分困难的T细胞膜转化的消除格外敏感。SP分组用蓝色的该线和橘色表示，HD分组用黑色的该线和橘色表示，橘色的该线/橘色表示ADPsp606。常用CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞膜开展分选。CD4+CD25−(反之亦然者)被cfsel上标，treg按观察的百分比滴定。用抗CD3 /28微珠转化细胞膜，人才3天后开展流式细胞膜术(CD25反染)和细胞膜因子分析。HD Treg与HD、SP或sp606反之亦然者共同人才。(a,b) CFSE转化(a)和CFSE消除次之(b)。(c,d) CD25消除次之(c)和CD134消除次之(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共人才当中的表示。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

结论：我们得出的结论是，来自比较较慢十分困难子的转化梦境CD4+Treg在GITR表示当中得到了适配和充沛，强调了进一步学术研究Treg在1HG癌症可能性生殖当中的差异性的必要性。

原文引自：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28